在细胞破裂的过程中，蛋白水解酶会被释放或激活，这会 complicate electrophoresis results and impact the final analytical outcomes. 为了避免这些问题的发生，建议在样品准备时尽量在低温条件下进行。此外，许多蛋白酶在pH 9以上会失活，因此使用Tris碱、碳酸钠或碱性载体的两性电解质通常能够抑制蛋白水解。然而，某些蛋白酶在这些条件下仍然是活跃的，因此在此情况下，应该使用蛋白酶抑制剂。对于我们所研究的蛋白而言，合理选择和高效使用蛋白酶抑制剂在蛋白纯化过程的设计中显得尤为重要。

蛋白酶抑制剂的种类繁多，常用的有PMSF与leupeptin等。由于单一蛋白酶抑制剂只能针对特定类型的蛋白酶，通常建议使用组合型蛋白酶抑制剂，比如广谱蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”。以下是关于蛋白酶的功能与分类的详细信息。

蛋白酶的功能

蛋白酶在细胞内外涉及多种重要功能，包括：

1. 促进消化道内食物蛋白的消化
2. 激活无活性酶原及多肽激素/神经介质的释放
3. 调节血液凝块和纤维素的生成
4. 内源性和外源性蛋白的细胞内消化
5. 介导跨膜蛋白的转移
6. 微生物对生物体的攻击，通过释放蛋白酶增加毒性

蛋白酶的分类

根据催化中心结构的不同，蛋白酶可以分为四类：

1. 丝氨酸蛋白酶：活性中心含有丝氨酸和组氨酸，如糜蛋白酶、弹性蛋白酶等。
2. 半胱氨酸蛋白酶（也称为SH蛋白酶）：催化中心含有半胱氨酸，如Calpain和组织蛋白酶B、C等。
3. 天冬氨酸蛋白酶：催化中心含有天冬氨酸，如组织蛋白酶D和木瓜蛋白酶。
4. 金属蛋白酶：催化中心含有金属离子（如锌2+），如氨基肽酶。

在分离蛋白时，组织或细胞裂解液往往会充满来自溶酶体的酶，而原本无活性的蛋白酶原则被充分激活，开始消化周围的蛋白质。为防止这种情况，应在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白酶对细胞组织的消化作用。来自哺乳动物、植物、霉菌或细菌的组织，其蛋白酶成分各不相同，并可能因机体状态的发展而变化。在哺乳动物组织的分离过程中，特别需要使用蛋白酶抑制剂，以确保组织细胞得到充分保护。

在这一领域中，尊龙凯时人生就博提供了多种高效的蛋白酶抑制剂，以支持生物医学研究的成功，确保实验结果的可靠性。