尊龙凯时人生就博推出的这款荧光定量PCR检测试剂盒，是基于探针法原理开发而成，具备多项优良特点：

产品特点

1. 即开即用：用户只需提供样品DNA模板，无需复杂操作。

2. 高灵敏度：引物等组分经过优化，显著提升灵敏度。

3. 阳性对照：提供阳性对照样品，方便实验中区分假阴性结果。

4. 高特异性：引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区，避免与其他生物样本DNA发生交叉反应。

5. 定性与定量兼具：既可用于定性检测，也可用于定量检测，定量时线性范围至少达到5个数量级。

6. 量大实惠：本产品能够支持50次20μL反应的荧光定量PCR实验。

7. 仅限科研使用：本产品专为科研用途设计。

使用方法

一、DNA提取（样本制备区）

用户可依据自选方法提取纯化样品DNA，本试剂盒与市面上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品（样本制备区）

为确保准确性，阳性对照的稀释运作须在独立区域进行，以避免样品和其他试剂的交叉污染。

1. 标记6个离心管，并按顺序标示为7，6，5，4，3，2。

2. 使用带芯枪头，分别向各个管加入45μL DEPC-H2O。

3. 在7号管中加入5μL阳性对照，震荡均匀后，得到浓度为1×10⁷拷贝/μL的样品，放冰待用。

4. 依次将稀释后的阳性对照加入到6号、5号等管中，重复同样的稀释操作，直到获得6个不同稀释度的标准样品。

若无需制作标准曲线，只需将阳性对照稀释至1×10⁵拷贝/μL即可。

三、试剂配制（试剂准备区）

如果有N个待检测样品，则需要准备N+2个qPCR管（包括1个阴性对照和6个阳性对照），将所需成分加入每个PCR管中。

四、添加模板（模板添加区）

向各个qPCR管中分别加入2μL模板，顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板和阳性对照，之后离心30秒，立即进行扩增反应。

五、扩增反应（扩增及产物分析区）

将PCR管放入PCR扩增仪器的适当位置，按照说明书中的程序进行扩增。

六、结果分析

若制作标准曲线，需以阳性对照浓度的log值为横轴，以Ct值为纵轴，绘制标准曲线。根据待测样品的Ct值从标准曲线上推算样品DNA浓度的log值。

如果未制作标准曲线，可按以下标准判定结果：

- 阳性对照的Ct值应小于30，且呈现明显的S型曲线。

- 阴性对照的Ct值应为38或无Ct值，呈现无明显增长。

- 检测样本的Ct值小于35，结果为阳性；如果Ct值在35到38之间，则需复检；若Ct值大于等于38，则结果为阴性。

运输及保存

本产品需在低温条件下运输，保存于-20℃，有效期为一年。阳性对照需单独存放，以防止污染其他试剂。

选择尊龙凯时人生就博，为您的生物医疗研究提供专业的支持与保障。