尊龙凯时人生就博的试剂盒仅限于科学研究,严禁用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)技术。操作时,首先将标本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入到已预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,随后进行温育并彻底洗涤。
通过底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下逐渐生成蓝色,最后在酸性环境中转变为黄色。显色深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。随后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过此值计算样品的浓度。
试剂盒组成
试剂盒包括:微孔酶标板、标准品、样本稀释液、检测抗体-HRP、洗涤缓冲液、底物A和B、终止液、封板膜以及说明书。请根据具体需求选择96孔或48孔的配置。
样品收集与处理
样品的收集、处理和保存方法如下:
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激;收集血液后以3000转离心10分钟迅速分离血清与红细胞。
- 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
- 细胞上清液:将样本以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:用生理盐水捣碎组织,并以3000转离心10分钟取上清。
- 保存:如未及时检测,请按一次用量分装,冷冻于-20℃,避免反复冻融。
操作注意事项
1. 从冷藏中取出的试剂盒应平衡至室温(15-30分钟)后方可使用;如未用完的酶标板需放入密封袋中保存。
2. 洗涤液可能存在结晶,稀释时可加热水帮助溶解,不应影响检测结果。
3. 各步骤需使用加样器,并确保其准确性,以避免误差;加样时间控制在5分钟内。
4. 每次检测最好同时进行标准曲线,并检测复孔;若样本OD值超出标准范围,应进行稀释后再测定。
5. 封板膜为一次性使用,防止交叉污染。
6. 严格按照说明书操作,试验结果必须以酶标仪读数为准。
7. 底物需避光保存,并将所有样品和废弃物按传染处理。
8. 不同批号的试剂组分不得混用。
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